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技术专栏

实验动物如何采血及采血管的选择
供稿:市场部发布时间:2023-07-27浏览量:432次

实验动物采血

在实验研究中,经常会采集实验动物血液用于分析和评估动物体内的生理和病理情况。根据不同的实验设计和要求及动物的特性和生理差异,选择合适的采血方法,可以减少动物伤害,提高实验的成功率和结果的可靠性。今天小编给大家普及下实验动物采血方法及采血管的选择。

 

01 大鼠、小鼠采血方法

尾尖采血(剪尾采血)

采血方法:动物麻醉后并固定,将鼠尾在45-50℃温水中浸泡数分钟,也可用二甲苯等化学药物涂擦,使局新血管扩张。擦干尾部,用酒精棉球消毒鼠尾,用无菌手术刀,快速截断小鼠尾尖约1-2mm,可以从尾部向尾尖方向按摩,以增加血流。用毛细采血管收集血液,或直接滴入收集管中。采血结束后,用干棉球按压伤口或使用止血剂来止血。

应用:所需血量少的连续多次采次,此法每只鼠可采血10余次。常用于红、白细胞计数、血红蛋白测定、制作血涂片等。

采血量:小鼠可每次采血约0.1ml,大鼠约0.4ml。

优点:操作较简单,动物不致死,可多次重复采血。

缺点:取血量少,约0.1ml,采血速度慢,不适于样本量大和需要较多血量的实验;不适用于老龄鼠;按摩鼠尾时可能会增加溶血风险,易污染。

颈静脉采血

采血方法:左手固定大鼠,使大鼠呈现腹部朝上的一个“十”字形,让大鼠颈部依靠在保定器上,颈部与前肢呈大于90°角,用头部固定器扭动颈部,使锁骨出现一个三角窝,去除锁骨附近被毛,酒精棉球擦拭消毒。右手持注射器,沿锁骨处进针(去除毛发后可清晰可见静脉处),刺穿皮肤后轻回拉注射器,使注射器产生负压。大约30度向上进针,当注射器内有血液出现时说明已经刺入采血位置,保持注射器,回拉注射器完成采血。采血完成后用干棉球稍按压止血即可。

应用:适用于人手少、动物数量多、实验时间紧以及药代动力学等需连续少量取血的研究中。

优点:相对于眼眶后静脉丛采血法对动物造成的疼痛感更小,更加符合动物福利,所以现在大有取代眼眶后静脉丛采血的趋势。本法适用于大鼠。

缺点:要求技术熟练,在一定时间内,如果采血量和采血次数增加,会使动物引起一定的应激性反应或采血部位的伤害。

眼眶静脉丛采血

采血方法:动物麻醉后并放置动物台上,用左手拇指和食指压迫小鼠颈部两侧同时将皮肤向后拉(注意避免用力过度压迫气管),使眼球外突,提示眼眶后静脉丛充血。右手拿一毛细管(建议采用0.5*100mm规格的毛细管,在使用前折成小段,每段大约3-4cm),置于内侧眼角处,并且以与鼻翼平面成30-45度沿内眦插入内眼角,滑入眼球后方,轻轻向眼底方向刺入。不能刺地过深,一般小鼠2-3mm,大鼠4-5mm即可。当感到阻力时即停止推进,转180°使斜面对着眼眶后界,即有血液流出。采血结束后,立即松开手指对小鼠的压迫,使眼球复位,同时拔出毛细管。可用干棉球压住眼眶,确保止血。

应用:适用于需中等量血液、避免小鼠死亡的血液指标连续监测。

优点:眼眶后静脉丛采血法简单,便于掌握,采血成功率高,小鼠死亡率低,血流较快。

采血量:小鼠可采血约0.2-0.3ml,大鼠约0.4-0.6ml。

缺点:采血后需要至少10天的组织修复过程,否则采血量产生一定影响;不能采集到无菌的血样,血液中可能混有眼窝内的组织液和腺体分泌物,对于血样要求较高的研究,应谨慎使用;易损伤眼球,易感染,造成失明。

腹主动脉采血法

采血方法:大鼠麻醉后仰卧固定在实验台上,将大鼠腹腔注射10%水合氯醛以0.03ml/kg麻醉5min即可。大鼠背部放置一粗试管以充分暴露腹主动脉,常规消毒后用手术剪刀沿腹正中线剪开腹腔。术后右手持穿刺针针尖斜面朝下入针角度约25°~30°朝向心端放向刺入,深度以5mm左右为宜,抽吸血液即可。

采血量:大鼠可采血约8~10ml,一般采3种血样全过程只需2min。

优点:该采血法取血量大、不易溶血,血液质量较好,适用于多项目检测,且不损伤器官,有利于病理组织学检查。

缺点:操作比较复杂,应注意掌握适宜的麻醉深度,防止心跳骤停,同时防止大鼠躁动。本方法造成的出血速度快,易造成出血性的心脏停跳,故要防止采血过程中出血。

 

02 豚鼠采血方法

耳缘切口采血:

先将豚鼠耳消毒,用刀片沿血管方向割破耳缘,切口约长0.5cm,在切口边缘涂上20%的柠檬酸钠溶液,防治血凝,则血可自切口处流出。此法采血每次可采0.5ml。

背中足静脉采血:

固定豚鼠,将其右或左后肢膝关节伸直,脚背消毒,找出足静脉,左手拇指和食指拉住豚鼠的趾端,右手将注射针刺入静脉,拔针后立即出血。

心脏采血:

用手指触摸,选择心跳最明显的部位,把注射针刺入心脏,血液即流入针管。心脏采血时所用的针头应细长些,以免发生采血后穿刺孔出血。

 

03 兔的采血方法

耳缘静脉采血:

将兔固定,拔去耳缘静脉局部的被毛、消毒,用手指轻弹兔耳,使静脉扩张,用针头刺耳缘静脉末端,或用刀片沿血管方向割破一小切口,血液即流出。本法为兔最常用的采血方法,可多次重复使用。

耳中央动脉采血:

在兔耳中央有一条较粗的、颜色较鲜红的中央动脉。用左手固定兔耳,右手持注射器,在中央动脉的末端,沿着与动脉平行的向心方向刺入动脉,即可见血液进入针管。由于兔耳中央动脉容易痉挛,故抽血前必须让兔耳充分充血,采血时动作要迅速。采血所用针头不要太细,一般用6号针头,针刺部位从中央动脉末端开始,不要在近耳根部采血。

颈静脉采血:

采血量超过1ml时,颈静脉是常用的采集部位。方法同大鼠颈静脉采血。

心脏采血:

使家兔仰卧,穿刺部位在第三肋间胸骨左缘3mm处, 针头刺入心脏后,持针手可感觉到兔心脏有节律的跳动。此时如还抽不到血,可以前后进退调节针头的位置,注意切不可使针头在胸腔内左右摆动,以防弄伤兔的心、肺。

 

04 狗的采血方法

后肢外侧小隐静脉采血:

后肢外侧小隐静脉位于后肢胫部下三分之一的外侧浅表皮下,由前侧方向后行走。采血时,将动物固定,局部剪毛、消毒,采血者左手紧握剪毛区上部或扎紧止血带,使下部静脉充血,右手用连有6号或7号针头的注射器刺入静脉,左手放松,已适当速度抽血即可。

前肢背侧皮下头静脉采血:

前肢背侧皮下头静脉位于前脚爪的上方背侧的正前位。采血方法同上。

颈静脉采血:

前两种方法需技术熟练,且不适于连续采血。大量或连续采血时,可采用颈静脉采血,方法同小鼠、大鼠的颈静脉采血方法。

股动脉采血:

本法为采取动脉血最常用的方法。操作简便,稍加训练的狗,在清醒状态下将狗卧位固定于狗解剖台上。伸展后肢向外伸直,暴露腹股沟三角动脉搏动的部位,剪毛、消毒,左手中指、食指探模股动脉跳动部位,并固定好血管,右手取连有5号半针头的注射器,针头由动脉跳动处直接刺入血管,若刺入动脉一般可见鲜红血液流入注射器,有时还需微微转动一下针头或上下移动一下针头,方见鲜红血液流入。有时可能刺入静脉,必须重抽。抽血毕,迅速拔出针头,用干药棉压迫止血2-3分钟。

红色头盖:普通血清管,采血管不含有任何添加剂,用于常规血清生化,血库和血清学相关检验;

桔红色头盖:快速血清管,采血管内有促凝剂,加速凝血过程。适用于急诊血清的化验系列;

金黄头盖:惰性分离胶促凝管,一般用于急诊血清生化试验;

绿色头盖:肝素抗凝管,一般用于红细胞压积实验,红细胞脆性试验,血气分析,血沉及普通的生化测定;

紫色头盖:又叫EDTA抗凝管,一般是用于普通的血液学检测,但是不适用于凝血实验及血小板功能的检测,也不能用于钠、钾、钙、铁、碱性磷酸等的测定;

浅蓝色的头盖:枸橼酸钠,凝血实验管;

黑色头盖:枸橼酸钠血沉实验管;

灰色头盖:草酸钾、氟化钠,氟化钠管,适用于血糖测定,一般不用于尿素酶法测定尿素,常用于血糖检测。

 

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